研究概要

猴痘（以前称为Monkeypox）的爆发已被宣布为国际关注的公共卫生紧急情况。然而，传统的聚合酶链式反应（PCR）诊断技术在现场应用中并不理想。

为了在实验室外进行从样本到结果的Mpox病毒颗粒检测，作者开发了一种易于操作的手掌大小的小袋，称为Mpox居家自检和卡点小袋（MASTR小袋）。

在这个掌上实验室（MASTR Pouch）中，通过将重组聚合酶扩增（RPA）与CRISPR/Cas12a系统相结合，实现了快速和准确的可视化检测。从病毒颗粒裂解到肉眼读出，MASTR Pouch只需要四个简单的步骤就能在35分钟内完成分析过程。渗出物中的53个Mpox伪病毒颗粒（10.6个颗粒/μL）能够被检测出来。

为了验证实用性，测试了104个模拟Mpox临床渗出物标本。临床敏感度被确定为91.7%-95.8%。没有出现假阳性结果，验证了100%的临床特异性。MASTR Pouch接近世界卫生组织的护理点诊断标准（ASSURD），这将有利于缓解Mpox的全球传播。MASTR Pouch的多功能性可能会进一步革新感染诊断。

关键技术

CRISPR技术；传染病；综合检测工具；Mpox；POCT诊断；重组酶聚合酶扩增

图1. 检测猴痘Mpox病毒的原理和操作

图2. 基于MASTR Pouch的即时检测（POCT）检测

图3. MASTR Pouch的性能验证

技术亮点

（1）该研究为猴痘（Mpox）的现场检测开发了一个手掌大小的工具袋，称为MASTR Pouch。

（2）从一个完整的样品到结果分析可以在35分钟内完成。

（3）制作了一个3D打印的迷你自动读出装置，以简化操作。

（4）为了实现敏感和特异的检测，主要采用RPA和CRISPR技术。

（5）临床敏感性被确定为91.7-95.8%，临床特异性为100%。

参考文献：

Wei J, Wang W, Yu Q, Zhang M, Xue F, Fan B, Zhang T, Gao Y, Li J, Meng X, Pang B. MASTR Pouch: Palm-size lab for point-of-care detection of Mpox using recombinase polymerase amplification and CRISPR technology. Sens Actuators B Chem. 2023 Sep 1;390:133950. doi: 10.1016/j.snb.2023.133950. Epub 2023 May 7.