PCR 常见问题分析及对策(无扩增产物)

发布日期:2023-06-28点击量:619次编辑:szbyjy_admin

问题:无扩增产物

现象:正对照有条带,而样品则无

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原因:

1.模板:含有抑制物,含量低

2.Buffer对样品不合适

3.引物设计不当或者发生降解

4.反应条件:退火温度太高,延伸时间太短

对策:

1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板 DNA 或加大模板的用量

2.更换 Buffer 或调整浓度

3.重新设计引物 (避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物

4.降低退火温度、延长延伸时间

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